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超氧陰離子清除能力檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/48S)

貨號(hào) SH0061 售價(jià)(元) 600
規(guī)格 50T/48S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

SH0061

超氧陰離子清除能力檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/48S)

50管/48樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。

測(cè)定原理:

AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,530nm有特征吸收峰樣品對(duì)超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負(fù)相關(guān)。

組成:

產(chǎn)品名稱(chēng)

SH0061-50T/48S

Storage

提取液:液體

50ml

4℃

試劑一:液體

3ml

4℃避光

試劑二:粉劑

一瓶

4℃避光

試劑液體

15ml

4℃

試劑液體

15ml

4℃避光

試劑液體

15ml

4℃避光

說(shuō)明書(shū)

一份

自備儀器和用品:

天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

樣品處理

1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g,加入1ml提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測(cè)。

4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/ml。

測(cè)定操作表

 

對(duì)照管

測(cè)定管

試劑一(μl

40

40

試劑二(μl

160

160

H2Oμl

100

 

充分混勻,25℃反應(yīng)1min

樣品(μl

 

100

試劑三(μl

200

200

充分混勻,37℃反應(yīng)30min

試劑四(μl

200

200

試劑五(μl

200

200

充分混勻,37℃顯色20min,于1ml玻璃比色皿,在530nm處測(cè)定對(duì)照管和測(cè)定管的吸光值,分別記為A對(duì)照管和A測(cè)定管。

注意:對(duì)照管只需測(cè)定一次。

  

計(jì)算公式

超氧陰離子清除率 I%=

注意事項(xiàng)

1. 試劑一4℃可保存2個(gè)月,配制好的試劑二4℃可保存一周,建議實(shí)驗(yàn)前配制,并盡快使用。

2. 樣品處理完后立即進(jìn)行測(cè)定,或者低溫保存不超過(guò)24小時(shí)。

 

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