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2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix
| 貨號(hào) | 25102 | 售價(jià)（元） | 1680 |
| 規(guī)格 | 100 rxn | CAS號(hào) |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix 適用于以 DNA 模板的 LAMP (環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增) 反應(yīng)。LAMP 是常見(jiàn)的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，使用 LAMP 特異性引物和鏈置換聚合酶 Bst.快速擴(kuò)增靶標(biāo)核酸。該試劑盒是 2×預(yù)混液，包含 Bst.鏈置換聚合酶和優(yōu)化的 LAMP 緩沖液。本產(chǎn)品中采用基因工程改造的 Tolo Bst. DNA polymerase，具有良好的耐熱性能，非常適宜 LAMP 擴(kuò)增。本產(chǎn)品同時(shí)提供熒光染料，便于在靶標(biāo)核酸擴(kuò)增過(guò)程中進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光監(jiān)測(cè)。
產(chǎn)品組分
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組分 |
25102 (100 rxns) |
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2 × Tolo Super LAMP Premix |
1.25 mL |
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50 × LAMP Floorescent Dye |
50 μL |
保存條件
≤ -20℃儲(chǔ)存，≤ 0℃運(yùn)輸；
實(shí)驗(yàn)流程
1.制備10 × LAMP Primers Mix：
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組分 |
體積 |
10 × 濃度（STOCK） |
1 × 濃度（STOCK） |
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FIP Primers（100 μM） |
16 μL |
16 μM |
1.6 μM |
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BIP Primers（100 μM） |
16 μL |
16 μM |
1.6 μM |
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F3 Primers（100 μM） |
2 μL |
2 μM |
0.2 μM |
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B3 Primers（100 μM） |
2 μL |
2 μM |
0.2 μM |
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Loop F Primers（100 μM） |
4 μL |
4 μM |
0.4 μM |
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Loop B Primers（100 μM） |
4 μL |
4 μM |
0.4 μM |
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ddH2O |
Up to 100 μL |
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◆ 在 nuclease-free water 中制備的 10 ×LAMP Primers Mix 可在–20°C 儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá) 2 年。
2.制備LAMP 反應(yīng)體系：
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組分 |
體積 |
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2 × Tolo Super LAMP Premix |
12.5 μL |
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10 × LAMP Primers（supplied by user） |
2.5 μL |
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50 × LAMP Floorescent Dye |
0.5 μL |
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Target DNA |
x μL（不超過(guò)反應(yīng)總體積的 1/10） |
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ddH2O |
Up to 25 μL |
◆ 室溫解凍所有組分后置于冰上，短暫渦旋并瞬離后使用。
◆ 吸取反應(yīng)預(yù)混液到所需的反應(yīng)容器中并添加待測(cè)樣品，短暫渦旋并瞬離后反應(yīng)。
◆ 建議設(shè)置無(wú)模板的陰性對(duì)照反應(yīng)體系，并用等體積的 nuclease-free water 補(bǔ)齊反應(yīng)體系。
3.LAMP 反應(yīng)程序
配制完成后，將上述反應(yīng)體系置于 65℃孵育 30～60 min。對(duì)于拷貝數(shù)較低的待測(cè)靶標(biāo)或復(fù)雜樣品類(lèi)型的反應(yīng)，可根據(jù)需要適當(dāng)延長(zhǎng)擴(kuò)增時(shí)間。85℃加熱 5 min 便可滅活體系中的 Bst.酶。
注意事項(xiàng)
1. 可在冰上或室溫條件下，將 2 × Tolo Super LAMP Premix 解凍，充分混勻后使用；不推薦對(duì)預(yù)混液進(jìn)行加熱溶解。
2. 建議反應(yīng)完成后避免開(kāi)蓋。如需瓊脂糖凝膠電泳或其他后續(xù)分析，應(yīng)在分區(qū)空間或單獨(dú)設(shè)備中進(jìn)行開(kāi)蓋。
3. 本產(chǎn)品僅供科研使用。